氯仿-甲醇提取法是一种广泛应用于生物化学和分析化学领域的脂肪提取方法。该方法利用氯仿和甲醇的相溶性差异,快速、高效地提取样品中的脂肪。
具体操作过程如下:
1. 准备样品:将待提取的样品(如动物组织或植物种子)粉碎并称量。
2. 加入溶剂:将样品加入试管或烧杯中,加入足量的氯仿和甲醇混合溶剂,使样品完全浸泡其中。通常,溶剂的体积比为2:1,即2份氯仿和1份甲醇混合。
3. 振荡混合:将样品和溶剂混合物放入振荡器中,以中等速度振荡30分钟至1小时,以充分提取样品中的脂肪。
4. 离心沉淀:将振荡混合物离心,使样品中的脂肪沉淀在离心管底部。
5. 分离上清液:用吸管或移液器将上清液转移到干燥的试管中,避免将沉淀物吸入。上清液中含有提取的脂肪和少量的溶剂。
6. 蒸发溶剂:将试管放入沸水浴中,加热蒸发残留的溶剂,留下提取的脂肪。
7. 称重:将提取的脂肪称重,计算出样品中脂肪的质量。
需要注意的是,在操作过程中需注意安全,如避免溶剂接触皮肤和吸入有毒气体。此外,在样品处理前,应去除水分和其它干扰物质,以保证提取的脂肪纯度。
综上所述,氯仿-甲醇提取法是一种简单、快速、高效的脂肪提取方法,被广泛应用于生物化学和分析化学领域。