网状纤维染色液是一种改良的GOMORI银氨法染色液,用于显微镜下观察组织切片中的网状纤维。该染色液的原理是通过银离子的还原作用,将组织切片中的蛋白质分子还原成黑色颗粒,从而显现出组织中的网状纤维。
操作步骤如下:
1. 将切好的组织切片放置于1%的氢氧化钠溶液中,加热至沸腾,使切片变软并去除脂肪。
2. 将切片用去离子水洗涤3次,每次5分钟。
3. 将切片置于2%硝酸中,使组织中的胶原蛋白变性。
4. 将切片用去离子水洗涤3次,每次5分钟。
5. 将切片置于网状纤维染色液中,温度控制在25℃左右,时间为20-30分钟。
6. 将切片用去离子水洗涤3次,每次5分钟。
7. 将切片置于5%次氯酸钠溶液中,对切片进行氧化处理。
8. 将切片用去离子水洗涤3次,每次5分钟。
9. 将切片置于5%硫酸中,进行酸化处理。
10. 将切片用去离子水洗涤3次,每次5分钟。
11. 将切片放置于2%碘酒中,进行显色处理。
12. 将切片用去离子水洗涤3次,每次5分钟。
13. 将切片置于1%亚甲基蓝溶液中,进行染色处理。
14. 将切片用去离子水洗涤3次,每次5分钟。
15. 将切片用96%乙醇进行脱水处理。
16. 将切片用苯胺油进行透明处理。
通过以上步骤,可以获得清晰明亮、色泽均匀的网状纤维染色切片。